Estudio en fibroblastos humanos del sistema angiotensina en la fisiopatología de la fibrosis pulmonar idiopática / The study of angiotensin system human fibroblasts in the physiopathology of idiopathic pulmonary fibrosis

En el tejido pulmonar de modelos murinos, la angiotensina II induce la proliferación de fibroblastos, su diferenciación a miofibroblastos y la producción de procolágeno tras su unión al receptor I de la angiotensina. Hemos estudiado el comportamiento de fibroblastos pulmonares humanos procedentes de una línea celular comercial tras la estimulación con TGF-β1. Hemos observado que estos fibroblastos, cuando son estimulados, aumentan la expresión de bFGF, colágeno y α-SMA. Tras el bloqueo del receptor de Angiotensina II con Losartan a una concentración de 10 µM y la estimulación con TGF- β1, se produce una disminución, tanto de los niveles de bFGF como de la concentración de colágeno, sin que llegue a alcanzar la significación estadística con respecto a las células no tratadas. En cuanto a la expresión de α-SMA como marcador de transformación a miofibroblastos, no había diferencias entre las células tratadas con TGF-β1 y TGF-β1 más losartán

In murine model lung tissue, angiotensin II induces the proliferation of fibroblasts, their distinction from myofibroblasts and procollagen production after its binding with the type 1 receptor. We have studied the behavior of human lung fibroblasts from a commercial cell line after stimulation with TGF-β1. We observed that those fibroblasts, when stimulated, increased bFGF, collagen and α-SMA expression. After blocking the angiotensin II receptor with losartan at a concentration of 10 µM and stimulation with TGF- β1, there was a decrease in both bFGF levels and collagen concentration, without reaching statistical significance with regard to untreated cells. With regard to α-SMA expression as an indicator of transformation to myofibroblasts, there were no differences between cells treated with TGF-β1 and TGF-β1 with losartan

Interacciones entre stents metálicos desnudos y liberadores de droga con fibroblastos respiratorios co-cultivados in vitro / Interactions between bare metal and drug eluting stents co-cultivated with respiratory fibroblasts in vitro

OBJETIVO: testar una línea de fibroblastos (MRC-5) frente a distintos tipos de stents metálicos, desnudos o con liberación de droga. MÉTODOS: co-cultivamos durante tres semanas dos stents metálicos desnudos (Zilver Flex(R), aleación de níquel-titanio, niti-nol) y Wallstent(R) (aleación de cobalto), y otros tres liberadores de paclitaxel o everolimus: Zilver PTX(R) (nitinol con 3 μg/mm2 paclitaxel), Taxus Liberté(R) (acero 316-L con 1 μg/mm2 paclitaxel) y Promus(R) (aleación de cromo-cobalto con evero-limus). Se determinaron los niveles de interleuquina 8 (IL-8), factor básico de crecimiento de fibroblastos (bFGF), factor de crecimiento vascular endotelial (VEGF), y TGF-β1 (Transfor-ming growth factor-beta). RESULTADOS: se observó gran proliferación celular alrededor de los stents desnudos (Zilver Flex(R) y Wallstent(R)), aunque con distinto ritmo en el crecimiento (más tardío y más intenso en el stent de nitinol, comparado con el de cobalto), mientras que la celularidad decreció rápidamente en los stents liberadores de droga, especialmente en el Zilver PTX(R), comparado con Taxus Liberté(R). Tras un crecimiento inicial relativamente lento, la celularidad se recuperó en el Promus(R), el cual destacó por sus altos niveles de IL-8 y de TGF-β1 en fases precoces. El Taxus Liberté(R)también indujo producción marcada de IL-8 in vitro. En conclusión, ninguno de los stents que hemos testado en el presente estudio sería suficientemente seguro para prevenir su encapsulación fibrótica, aunque el stent de nitinol desnudo sería, por el momento, el menos agresivo en este sentido

OBJECTIVE: test a line of fibroblasts (MRC-5) against different types of bare metal or drug eluting stents. METHODS: we co-cultivated two bare metal stents for three weeks (Zilver Flex(R), nickel-titanium alloy, shape-memory alloy) and Wallstent(R) (cobalt alloy), and other three paclitaxel-eluting or everolimus-eluting stents: Zilver PTX(R) (shape-me-mory alloy with 3 μg/mm2 paclitaxel), Taxus Liberté(R) (steel 316-L with 1 μg/mm2 paclitaxel) and Promus(R) (chromium-cobalt alloy with everolimus). The levels of interleukin-8 (IL-8), basic fibroblast growth factor (bFGF), vascular en-dothelial growth factor (VEGF), and TGF-β1 (Transforming growth factor-beta) were determined.RESULTS: a large proliferation of cells was observed around the bare stents (Zilver Flex(R) and Wallstent(R)), although with different speeds of growth (slower and more intense with the shape-memory nitinol alloy stent, compared with that of cobalt), while the number of cells decreased rapidly with the drug eluting stents, especially the Zilver PTX(R), compared with Taxus Liberté(R). After a relatively slow initial growth, the number of cells recovered in the Promus(R), which stood out in association with its high levels of IL-8 and of TGF-β1 in early phases. The Taxus Liberté(R) also induced a marked pro-duction of IL-8 in vitro. In conclusion, none of the stents we tested in this study would be sufficiently safe to prevent their fibrotic encapsulation, although the bare shape-memory alloy stent (nitinol) would, for the time being, be the least aggressive in this regard

Expresión de aquaporinas en tejido pulmonar de pacientes con enfermedad pulmonar obstructiva crónica / Aquaporin expression in the lung tissue of copd patients

INTRODUCCIÓN: Estudio de la expresión de aquaporinas (AQP1 y AQP5) en el tejido bronquial y parénquima pulmo-nar de pacientes con enfermedad pulmonar obstructiva cróni-ca (EPOC) y fumadores sin la enfermedad. MÉTODO: Utilizando un diseño caso-control, se seleccionó un grupo de 15 pacientes con EPOC (93,3% varones, con una edad media de 68 años, una media de FEV1 del 72% y 26,7% con corticosteroides inhalados) y 15 fumadores sin la enfermedad, a los cuales se les sometió a cirugía de resección pulmonar por neoplasia pulmonar. Se estudió la expresión de AQP1 y AQP5 en el tejido bronquial y en parénquima pulmo-nar mediante reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real.RESULTADOS: No encontramos diferencias en la expresión génica de estas AQPs en ambos territorios pulmonares entre los pacientes con EPOC y los fumadores sin la enfermedad. Sin embargo, en los pacientes EPOC, la expresión de AQP1 era 2,41 veces mayor en el parénquima comparado con los controles, mientras que la AQP5 mostraba un patrón inverso, con 7,75 veces mayor expresión en el tejido bronquial de los sujetos control.CONCLUSIÓN: Los resultados del presente trabajo proporcio-nan evidencia inicial respecto a la expresión de AQP1 y AQP5 en pacientes con EPOC

INTRODUCTION: Study of aquaporin expression (AQP1 and AQP5) in the bronchial tissue and lung parenchyma of pa-tients with chronic obstructive pulmonary disease (COPD) and smokers without the disease. METHOD: Using a case-control design, a group of 15 patients with COPD was selected (93.3% males, with an average age of 68 years, an average FEV1 of 72% and 26.7% with inha-led corticosteroids) and 15 smokers without the disease, who underwent lung resection surgery due to lung neoplasm. The expression of AQP1 and AQP5 in the bronchial tissue and in lung parenchyma was studied using real-time polymerase chain reaction (PCR). RESULTS: No differences were found in the gene expression of these AQPs in either lung territories between the patients with COPD and the smokers without the disease. Nevertheless, in the COPD patients, the expression of AQP1 was 2.41 times greater in the parenchyma compared with the controls, while the AQP5 showed an inverse pattern, with 7.75 times greater expression in the bronchial tissue of the control subject. CONCLUSION: The results of this study provide initial evidence regarding the expression of AQP1 and AQP5 in patient with COPD